Molecular cloning and expression of Bacillus anthracis Lethal Factor domain 1 gene in Escherichia coli

Rezaie, Mehdi. and Honari, hossein. and Zand, Ali Mohammad. (2012) Molecular cloning and expression of Bacillus anthracis Lethal Factor domain 1 gene in Escherichia coli. Journal of Shahrekord Uuniversity of Medical Sciences, 14.

[img]
Preview
Text
33.pdf

Download (728kB) | Preview
Official URL: http://journal.skums.ac.ir/article-1-1001-fa.html

Abstract

زمینه و هدف: سیاه‌زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می‌باشد که آنتی‌ژن حفاظت‌کننده (PA) و ناحیه یک فاکتور کشنده (LFD1) ایمونوژن‌های قوی این باکتری بوده و همواره به عنوان کاندیدای واکسن علیه باسیلوس آنتراسیس در نظر گرفته شده‌اند. هدف این مطالعه تولید آنتی‌ژن ناحیه یک فاکتور کشنده(LFD1) در باکتری Escherichia coli می‌باشد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی ژن LFD1 از پلاسمید pXO1 شناسایی و با واکنش PCR تکثیر شد. با جایگاه‌های آنزیمی BamH I و Xho Iدر وکتور (pGEM-T easy) همسانه‌سازی شد و بعد از جداسازی به وکتور بیانی pET28a(+) زیرهمسانه‌سازی گردید. این وکتور به باکتری E. coli-BL21 (DE3) تراریخت (ترانسفورم) شد. بیان ژن LFD1 تحت القای ایزوپروپیل-β -ِD -I-گالاکتوپیرانوزید (IPTG) انجام و پروتئین مورد نظر بیان شد. یافته‌ها: ژن ناحیه یک فاکتور کشنده (LFD1) کلون شده در وکتور بیانی pET28a(+) به وسیله‌ی توالی یابی، PCR و هضم به وسیله آنزیم‌های با اثر محدود تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید ژل (SDS-PAGE) و لکه‌گذاری وسترن تایید گردید. نتیجه‌گیری: با توجه به ایمونوژن بودن پروتئین LFD1، پروتئین نوترکیب تولید شده در این تحقیق را می‌توان به‌صورت مجزا یا ترکیبی با یاورها و یا انتقال دهنده‌ها در طراحی واکسن برای بیماری سیاه‌زخم استفاده نمود.

Item Type: Article
Uncontrolled Keywords: Anthrax, Bacillus anthracis, Lethal factor domain 1, Recombinant protein
Subjects: QU Biochemistry > Cell biology and genetics
QW Microbiology and Immunology
Divisions: Reserach Vice-Chancellar Department > Journal of Shahrekord University of Medical Sciences
Depositing User: zahra bagheri .
Date Deposited: 29 Aug 2017 07:34
Last Modified: 07 Mar 2018 09:26
URI: http://eprints.skums.ac.ir/id/eprint/3918

Actions (login required)

View Item View Item