Construction of single domain camel antibody library against breast cancer cellular antigens

Ayat, H. and Musavian, S.A. and Ahadi, A.M. and behvandi, E. and pirali, Kh. and Mahzounieh, M.R. (2014) Construction of single domain camel antibody library against breast cancer cellular antigens. Journal of Shahrekord Uuniversity of Medical Sciences, 16.

[img]
Preview
Text
57.pdf

Download (494kB) | Preview
Official URL: http://journal.skums.ac.ir/article-1-1507-fa.html

Abstract

زمینه و هدف: آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری Camelied-derived heavy chain) (VHH= یک آنتی بادی شتری بوده و کوچک ترین واحد باند شونده به آنتی ژن است. اندازه کوچک نانوبادی ها بزرگ ترین مزیت آن ها می باشد که سبب دستکاری ژنتیکی راحت آن ها می شود. این مطالعه با هدف ساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین از شتر ایمن شده با یک رده سلولی آدنوکارسینومای سینه ی انسان (SKBR3) طراحی و اجرا شد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی ابتدا عصاره سلول SKBR3 طی سه نوبت به صورت زیر پوستی به یک شتر تزریق گردید. سپس RNA کامل از طحال شتر استخراج و قطعات VHH به کمک روش RT-PCR ساخته و تکثیر شدند. قطعات VHH در درون فاژمید Pcomb3x قرار گرفتند و به روش الکتروپوریشن قطعات نوترکیب وارد باکتری های DH5α شدند. تنوع کتابخانه ی تهیه شده توسط تکنیک انگشت نگاری آنزیمی مورد بررسی قرار گرفت و در نهایت بیان VHH با روش SDS-PAGE ارزیابی شد. یافته ها: در این پژوهش کتابخانه آنتی بادی شتری با بیش از 105 کلونی ساخته شد. همچنین انگشت نگاری آنزیمی نشان داد که کتابخانه ی آنتی بادی حاصل دارای تنوع بالایی می باشد. بررسی های اولیه بوسیله SDS-PAGE مشخص کرد که پروتئین VHH با وزن مولکولی 15 کیلو دالتون در باکتری های ترانسفورم شده بیان می شود. نتیجه گیری: تهیه ی کتابخانه ی آنتی بادی ایمن بر ضد رده سلولی SKBR3، امکان جداسازی آنتی بادی های اختصاصی VHH بر ضد آنتی ژن های مختلف سرطان سینه را فراهم می کند.

Item Type: Article
Uncontrolled Keywords: VHH, Camel antibody library, Breast cancer.
Subjects: WP Gynecology
QZ pathology-Neoplasms
QU Biochemistry > Cell biology and genetics
Divisions: Reserach Vice-Chancellar Department > Journal of Shahrekord University of Medical Sciences
Depositing User: zahra bagheri .
Date Deposited: 27 Aug 2017 08:33
Last Modified: 27 Aug 2017 08:33
URI: http://eprints.skums.ac.ir/id/eprint/3705

Actions (login required)

View Item View Item